一、 糧油谷物飼料中霉菌毒素污染情況
霉菌毒素是由產毒真菌在適宜的環(huán)境條件下產生的有毒代謝產物.根據聯合國糧農組織資料,世界上約有25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染而不能食用,不僅給經濟上造成了巨大損失,而且由真菌產生的霉菌毒素還能引起人畜中毒,嚴重時甚至可以引起致癌。
目前已知能產生霉菌毒素的真菌有150余種,產生的霉菌毒素約有300種,其中包括了黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物類毒素、嘔吐毒素、伏馬菌素、T2毒素等。真菌的生長和繁殖都需要一定的溫、濕度條件,最適宜生長溫度一般為20~30℃,霉菌繁殖產毒的最適溫度為25~30℃。其中曲霉菌屬最適宜生長溫度為30℃左右,青霉菌屬為25℃左右,鐮刀菌屬一般為25℃左右。當真菌處于干燥、低溫或處于與其他真菌競爭的應激情況時,就會產生霉菌毒素,由于真菌生長有一定的地域性,因此,不同區(qū)域占優(yōu)勢的霉菌毒素種類也不同,如在亞熱帶和熱帶地區(qū),農產品和飼料主要被黃曲霉素和某些赭曲毒素污染;而玉米赤霉烯酮、嘔吐霉素、赭曲霉毒素A、T-2毒素、煙曲霉毒素則在溫帶地區(qū)占有顯著優(yōu)勢。
據我國糧油谷物飼料霉變情況調查報告,真菌的檢出率和含量,南方地區(qū)都大大高于北方地區(qū),特別是5~9月份,南方地區(qū)的平均氣溫都處于20℃以上,平均相對濕度在80%以上,這種高溫高濕的環(huán)境條件下,真菌生長繁殖最為旺盛,谷物飼料霉變大多發(fā)生在這個季節(jié);北方的夏季雖然溫度較高,但相對濕度較低,不易霉變,但常因加工、運輸或貯存不當而產生霉菌毒素。
目前霉菌毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認方法和快速方法。確認方法主要基于理化儀器設備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯用技術如氣質聯用(GC-MS)、液質聯用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學基礎上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。
結果準確、法定認可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設備價格昂貴,前處理過程復雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內控檢測,一般僅用于最終的確證。酶聯免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作過程相對復雜,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復雜,重復性較差;膠體金檢測卡可以滿足現場快速的要求,能在5-10min內快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復性差。
二、 霉菌毒素限量標準
2.1糧油谷物等食品中霉菌毒素限量標準
2.2飼料及原料中霉菌毒素限量標準
三、 上海飛測糧油谷物飼料中霉菌毒素熒光定量快速檢測系統-10min準確定量測定
上海飛測生物基于全球領先的熒光定量FPOCT技術平臺,開發(fā)了霉菌毒素熒光定量快速檢測系統,該系統結合了膠體金快速、酶聯免疫定量以及色譜法準確的特點,可在10min內快速準確定量的測定出糧油谷物飼料中的霉菌毒素,包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等含量,樣品前處理簡單(僅需8min),六種毒素一次提取即可,操作簡便,只需一步加樣,無需標準品,無需做標準曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數,結果準確可靠且可現場打印,準確性高度符合HPLC法的檢測結果,為霉菌毒素的快速檢測和控制提供了一種全新的技術手段,適用于各類原料收儲、糧油加工企業(yè)、飼料加工企業(yè)、第三方檢測機構及政府相關監(jiān)管部門。
3.1. 熒光定量FPOCT檢測原理
當將樣品滴加在加樣區(qū)時,樣品中的待測物與結合墊中的熒光微球標記抗體結合并通過毛細作用向前層析,當達到檢測區(qū)后,檢測線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標記抗體結合,檢測線T線上結合的熒光微球標記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,質控線C線結合的熒光標記物樣品中待測物的量無關,其它熒光標記物繼續(xù)層析達到吸收區(qū)。層析結束后,采用熒光讀數儀的讀取T線和C線的熒光強度并計算T/C值,通過儀器內置的標準曲線即可計算出樣品中待測物的含量。
3.2. 稀土元素銪的特點
1、稀土元素Eu的熒光強度比普通熒光染料高1-3個數量級,檢測靈敏度更高;
2、激發(fā)后的熒光壽命長達1ms,比普通熒光染料的10-50ns長得多,通過讀數儀的延遲讀數功能,消除基質本底的干擾,檢測結果的準確度和精確度更高;
3、激發(fā)光和發(fā)射光的Stokes 位移寬達270nm,遠遠大于普通熒光染料的10-50nm,有效降低激發(fā)光和發(fā)射光的互相干擾,同樣可以提升檢測結果的準確度和精確度;
4、熒光的發(fā)射峰非常尖銳,更有利于檢測儀器對熒光信號的采集和接收,提升檢測結果的可靠性;
3.3. 熒光納米微球的包裹和修飾
采用聚苯乙烯納米微球對稀土熒光離子銪進行包裹,通過熒光預增強技術,提升單個熒光離子的熒光強度。通過對包裹技術的優(yōu)化和改良,納米微球中銪離子的密度可提升到10萬個/微球,包裹完熒光離子后,在微球表面再進行葡聚糖修飾,大大提升了微球的穩(wěn)定性和對可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎上可開發(fā)出靈敏度高于普通膠體金或有色乳膠免疫層析方法2-3個數量級的定量檢測技術。
3.4熒光納米微球的包裹和修飾熒光定量FPOCT技術平臺的優(yōu)勢
3.5熒光定量FPOCT技術平臺與其他方法學技術性能的對比
3.6上海飛測霉菌毒素熒光定量快速檢測試紙條性能
3.7檢測所需配套的儀器和耗材
3.8檢測操作過程
檢測操作視頻
操作過程示意圖如下:
3.9結果判讀和輸出
所有產品均采用便熒光免疫定量分析儀進行讀數,使得檢測結果更加準確、客觀,避免人為的誤判。
檢測結果將呈現于熒光讀數儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質的檢測報告,另外,開通儀器的WIFI數據上傳功能后,檢測相關數據信息將自動上傳至“食品安全溯源管理云平臺”,便于溯源及質量管理。
3.10上海飛測霉菌毒素熒光定量快速檢測系統優(yōu)勢
? 10min快速定量:集膠體金快速檢測、酶聯免疫定量檢測、色譜質譜準確檢測的特點于一身,實現10min內霉菌毒素的快速準確定量檢測,檢測結果可現場打印;
? 內置定量標準曲線:儀器內置標準曲線,無需檢測時再做標準曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保護操作人員的安全;
? 隨到隨檢:對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,并可實現現場檢測;
? 操作簡便:一次提取即可檢測所有種類的霉菌毒素,也無需對檢測樣本進行任何pH的調節(jié);
? 配置要求低:對配套的儀器設備及人員要求低,操作人員僅需短期培訓就能熟練掌握;
? 遠程網絡支持:儀器可通過網絡自動進行標準曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質量控制等;
? 性價比高:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜檢測的結果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測費用;
3.11熒光免疫定量分析儀基本參數
? 型號:FD-100
? 儀器尺寸:210mm×197mm×84mm
? 觸屏尺寸:3.5英寸
? 重量:1.4kg
? 激發(fā)光源 :LED
? 激發(fā)光譜 中心波長λ0=365nm
? 接收光譜 中心波長λ1=610nm
? 接口:RS232、USB
? 打印:內置熱敏打印機
? 數據儲存:≥10000條
? 檢測時間:8秒/個
? 檢測通量:450個/小時
? 臺內精密度 CV≤0.5%(大于50%光強)
? 臺間精密度 CV≤1.0%(大于50%光強)
? 儀器信噪比:0.01%(1:10000)
? 帶一維碼、二維碼掃描參數輸入模塊
? 帶無線傳輸模塊
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