時間:2016-05-23來源:飛測生物點擊量:
黃曲霉毒素嚴重污染以花生、稻米、植物油為代表的谷物、莢果、豆類、植物油等農產品,常發生在農產品生產、收獲、晾曬、運輸、儲藏、加工、銷售等各個環節,必須從全過程檢測和監控黃曲霉毒素,從源頭解決農產品質量安全問題。由于中國花生、玉米等農產品具有小規模生產方式以及鮮活農產品貨架期短等特點,迫切需要檢測成本低、測定快速、適于現場定量篩查的檢測技術標準。現有黃曲霉毒素檢測主要是ELISA等快速篩查技術和色譜/質譜的確證檢測技術。本研究建立的時間分辨熒光免疫層析快速檢測技術與現有快速篩查技術相比具有能定量檢測、假陽性少、重復性好、操作更簡單等優點;與確證性檢測技術相比,無需昂貴大型儀器,易于實現田間即時檢測,適用于中國農業檢測實際情況。
本研究實現了將Eu3+包覆于硅膠機制,形成硅膠熒光微粒作為時間分辨熒光標記物,顯著增強了時間分辨熒光強度,提高了熒光穩定性,并且具有良好的水溶性和生物兼容性。黃曲霉毒素高特異性抗體是實現高靈敏時間分辨熒光檢測的核心材料。本研究使用自主研發的高特異性抗體,顯著提高檢測靈敏度。與已有的膠體金試紙條方法相比,該方法的靈敏度提高了1—2個數量級。高靈敏度的時間分辨熒光主要來源于以下3個方面:(1)時間分辨熒光具有較大Stock位移,減少了由激發光引起的特異雜散光對檢測的干擾,提高熒光檢測穩定性;(2)時間分辨熒光壽命長,消除了環境中熒光物質對待測物的干擾;(3)時間分辨熒光激發波長較寬,發射光譜范圍較窄,降低了本底熒光強度,提高了分辨率。
(本段引用自: 張兆威, 李培武, 張奇, 丁小霞. 農產品中黃曲霉毒素的時間分辨熒光免疫層析快速檢測技術研究. 中國農業科學, 2014, 47(18): 3668-3674[ZHANG Zhao-wei, LI Pei-wu, ZHANG Qi, DING Xiao-xia. Study on Time-Resolved Fluorescence Immunochromatography for Afaltoxin Determination in Agricultural Product. Scientia Acricultura Sinica, 2014, 47(18): 3668-3674] )
上海飛測生物聯合農業部生物毒素檢測重點實驗室,推出了全球首款黃曲霉毒素B1熒光定量快速試紙條(熒光定量免疫層析法),榮獲2015年度國家技術發明二等獎,打破了國外產品在這一領域的技術優勢,性能優于國外相關產品。本產品可在10min內快速定量檢測各種糧食谷物、植物油、飼料原料及部分飼料中黃曲霉毒素B1的含量,樣品前處理簡單,操作簡便,采用熒光讀數儀讀數,結果準確可靠,適用于各類糧食、糧油、飼料加工企業及檢測機構。
一、黃曲霉毒素B1熒光定量試紙條技術性能
1、 靈敏度:0.5ng/mL;
2、 定量線性范圍:1.0ng/mL - 50.0 ng/mL;
3、樣品前處理時間:8min;
4、檢測時間:10min;
5、準確度:添加回收率為80%-125%;
6、 特異性:在1000 ng/mL濃度水平下與其它真菌毒素無交叉反應;
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